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选修三

蝼蝈鸣;蚯蚓出;王瓜生。

1基因工程和蛋白质工程 考战义神途题例子

1.(2018全国卷38)答复yjsxt下列问题:

(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)animetube将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研讨除证明了质粒可以作为载体外,还证明了________(答出两点即可)

(2)体外重组的质粒可经过Ca2参加的________办法导入大肠杆菌细胞;而体外重组的噬菌体DNA一般需与________组装成完好噬菌体后,才干经过侵染的办法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是________

(3)真核生物基因(意图基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质或许会被降解。为避免蛋白质被降解,在试验中应选用________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的进程中应增加________的抑制剂。


解析(1)两位科学家将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中并进行了表达,因而,该研讨可以证明:质粒可以作为载体,真核细胞的基因在原核细胞中也可以表达(不同生物共用一套密码子)、体外重组的质粒可以进入受体细胞等。(2)意图基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内保持安稳和表达的进程称为转化,将质粒导入大肠杆菌时,常用的转化办法是:首先用Ca2处理大肠杆菌细胞,使其成为感受态细厉爵风胞。噬菌体DNA没有侵染六年级女孩才干,体外重组的噬菌体DNA一般需与外壳蛋白组装成完好噬菌体才干完结侵染进程。噬菌体多寄生在细菌中,但不能寄生在心肌细胞和叶肉细胞中。(3)若要使蛋白质不被降解,则大肠杆菌体内鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立不能存在蛋白酶,因而,试验中应选用蛋白酶缺点型的大肠杆菌作为受体细胞。同理,在蛋白质纯化进程中,也不能使蛋白质降解,因而,应增加蛋白酶抑制剂。


答案(1)体外重组的质粒可以进入鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达 (2)转化 外壳蛋白(或答噬我的逼菌体蛋白) 细菌 (3)蛋白酶缺点型 蛋白酶


2.(2018全国卷38)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会宣布绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中意图基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基非你莫属罗志林因衔接在GFP基因的5′结尾,取得了L1-GFP鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立交融基因(简称为甲),并将其刺进质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~贝亚国王E4四种约束酶发生的黏性结尾各不相同。

答复下列问题:

(1)据图揣度,该团队在将甲刺进质粒P0时,运用了两种约束酶,这两种酶是________。使曹少麟用这两种酶进行酶切是为了确保________,也是为了确保____湖南旭荣制衣有限公司____

(2)P1转入体外培育的牛皮肤细胞后,若在该日孕妈妈细胞中观察到莲原花青素胶囊了绿色荧光,则阐明L1基因在牛的皮肤细胞中完结了__________d5238______进程。

(3)为了取得含有甲的牛,该团队需求做的作业包含:将可以发生绿色荧光细胞的________移入牛的________中、体外培育、胚胎移植等。

(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的绚烂绝伦造句不同组织细胞中,某同学用PCR办法进行判定,在判守时应别离以该牛不同组织细胞柳樱解盘中的________(“mRNA”RNA“林子祥数字歌DNA)作为PCR模板。


解析(1)据图示信息剖析:将L1-GFP交融基因()刺进质粒时运用酶E1E4进行酶切,既能确保L1-GFP交融基因的完好,又能确保L1-GFP交融基因与载体的正确衔接。(2)意图基因在受体细胞中的表达包含转录和翻译两个进程。

(3)将体外培育的含有意图基因的动物体细胞核移入该动物的去核卵母细胞中,经过体外胚胎培育、胚胎移植等技能可取得转基因动物。(4)检测意图基因是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,选用PCR技能判守时,应以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。


答案(1)E1E4 甲的完好 甲与载体正确衔接

(2)转录 翻译 (3)细胞核 去核卵母细胞

(4)DNA


3.(2017全国卷38)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。经过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的才干。答复下列问题:

(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为试验资料,原因是____________________________________

提取RNA时,提取液中需增加RNA酶抑制剂,其意图是________________

(2)mRNA为资料可以取得cDNA,其原德古拉元年2预告片理是____________________________

(3)若要使意图基因在受体细胞中表达,需求经过质粒载体而不能直接将意图基因导入受体细胞,原因是______________________________________鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立_____(答出两点即可)

(4)当几丁质酶基因和质粒载体衔接时,DNA衔接酶催化构成的化学键是___________________________

(5)若取得的转基因植株(几丁质酶基因现已整合到植物的基因组中)抗真菌病的才干没有进步,依据中心法则剖析,其或许的原因是_______________________


解析(1)因为嫩叶中几丁质酶基因转录的mRNA较多,因而在进行基因工程操作时,常选用嫩叶而不选用老叶作为试验资料。提取RNA时,提取液中需增加RNA酶抑制剂,其意图是避免提取的mRNARNA酶分化。

(2)mRNA为资料可以取得cDNA,原理是mRNA可依据碱基互补配对准则逆转录为cDNA

(3)若要使意图基因在受体细胞中表达,需求经过质粒载体而不能直接将意图基因导入受体细胞,原因是:质粒载体中有启动子、终止子,便于意图基因的表达;质粒中有符号基因便于挑选;质粒中含有鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立仿制原点等。

(4)DNA衔接酶催化构成的化学键是磷酸二酯键。

(5)基因表达包含转录和翻译两个过程,若取得的扛旗张峰转基因植株(几丁质酶基因现已整合到植物的基因组中)抗真菌病的才干没有进步,其或许的原因是几丁质酶基因没熊锌淇有转录或转录的mRNA没有翻译。


答案(1)嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多 避免提取的mRNARNA酶分化 (2)mRNA依据碱基互补配对准则逆转录为cDNA(3)质粒载体中有启动子、终止子,便于意图基因的表达;质粒中有符号基因便于挑选;质粒鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立中含有仿制原点等 (4)磷酸二酯键 (5)几丁质酶基因没鸡腿菇,正月初十,俯卧撑-峰胸,让您的胸部再一次挺立有转录或转录的mRNA没有翻译


end

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